витрификация ооцитов что это такое
Витрификация ооцитов (яйцеклеток)
Технологии криоконсервации широко используются в современной медицине как способ сохранить любой, даже самый чувствительный к окружающей среде, биоматериал. Невозможно переоценить значение криоконсервации в репродуктивной медицине: ее применяют к ооцитам (яйцеклеткам). И самым передовым методом криоконсервации является витрификация ооцитов.
Что такое витрификация?
В репродуктивной медицине используются женские яйцеклетки и ооциты (несозревшие яйцеклетки), которые особенно чувствительны к заморозке: возникшие кристаллики льда могут сделать оболочку биоматериала более грубой и труднодоступной для проникновения сперматозоидов. Таким образом, биоматериал после обычной криозаморозки яйцеклеток становится менее качественным. Витрификация – это способ криоконсервации, при котором заморозка осуществляется в сверхбыстром режиме таким образом, что кристаллики льда, которые могут повредить ооциты, не успевают образовываться. После заморозки яйцеклеток методом витрификации процент успешной разморозки составляет до 99%, в то время как при обычной криоконсервации этот показатель составляет только 60%. Криоконсервация широко используются при таких процедурах, как ВМИ и ЭКО, она незаменима в суррогатном материнстве.
Возрастные ограничения для процедуры
Заморозка ооцитов, яйцеклеток и эмбрионов пользуется спросом именно из-за возрастных факторов, которые влияют на вероятность зачатия. Витрификация дает возможность отложить беременность до момента готовности к материнству и значительно повысить шансы на успешное зачатие, поскольку «молодой» биоматериал лучше способен на это. Поэтому вопрос о том, до какого возраста есть смысл проводить заморозку яйцеклеток, открыт для каждой женщины. Криоконсервация ооцитов показана в возрасте от 20 до 35 лет, когда способность биоматериала к овуляции особенно высока. После 35 лет способность яйцеклеток к воспроизводству потомства снижается, второй критический возраст – 38 лет.
Витрификация донорских ооцитов
Из аналогичных соображений исходят при отборе доноров для получения ооцитов – принимается материал от женщин в возрасте от 20 до 30 лет. Заморозка яйцеклеток «впрок» осуществляется в тех случаев, когда собственная яйцеклетка женщины не способна к оплодотворению. Это один из способов решения проблемы женского бесплодия.
Подготовка к заморозке яйцеклеток
Подготовка к процедуре криоконсервации ооцитов состоит из ряда этапов/
Консультация врача
На этом этапе выясняются причины, по которым будет проводиться заморозка яйцеклеток. Также решаются организационные вопросы: подписание договора и оплата услуг.
Медицинское обследование
Хотя криоконсервация яйцеклеток проводится не только по медицинским показаниям, состояние здоровья женщины играет большую роль в успехе процедуры.
Стимуляция яичников
Перед тем как начнется криоконсервация ооцитов, необходимо с помощью гормональных препаратов и витаминотерапии стимулировать яичники для получения большего количества яйцеклеток. Для того чтобы понять, готовы ли яйцеклетки к пункции, потребуется сделать УЗИ-мониторинг. В случае отрицательного результата гормональная терапия продолжается.
Перед процедурой
За 2-3 дня до забора яйцеклеток для криоконсервации женщине необходимо отказаться от половых контактов, алкоголя и курения. За 8 часов до процедуры нельзя употреблять пищу, а за 2 часа следует отказаться от любых жидкостей.
Как проходит криоконсервация яйцеклеток?
Заморозка яйцеклеток – это не только собственно криоконсервация в лаборатории, так как происходит она в три этапа.
Пункция фолликулов
Пункция – это забор яйцеклеток из фолликулов яичников, который осуществляется в операционной. Во время процедуры пациентка сидит в гинекологическом кресле. Предварительно анестезиолог применяет анестезиологическое пособие, которое было для нее разработано: процедура проходит под общим наркозом или местной анестезией. Забор яйцеклеток проводится под контролем УЗИ с помощью специальных катетеров врачом репродуктологом. Процедура занимает около 15-20 минут.
Процедура криоконсервации
Сразу после забора фолликулярная жидкость попадает к эмбриологу, который сканирует ее на наличие ооцитов. Чем больше ооцитов, тем лучше: рекомендуется замораживать не менее 30 яйцеклеток. Перед криоконсервацией ооциты отправляются на инкубацию, после чего созревшие яйцеклетки замораживаются в лаборатории. Замороженный материал отправляется на хранение.
Реабилитация женщины
После процедуры состояние женщины оценивают гинеколог и анестезиолог, но обычно для реабилитации достаточно полежать 2 часа. Это позволяет избежать осложнений после процедуры, но после забора яйцеклеток для криоконсервации обычными последствиями являются слабость и тянущая боль внизу живота. В день процедуры женщина может вернуться домой, ей необходимо будет на сутки отказаться от алкоголя и острой еды.
Витрификация женских ооцитов и яйцеклеток: цена
Криоконсервация яйцеклеток проводится в крупных городах России, в том числе в Санкт-Петербурге, и во многом стоимость зависит от престижа клиники, а также программы, которую она предлагает. Выбирая клинику для криоконсервации яйцеклеток, стоит убедиться в том, что речь идет именно о витрификации, которая стоит дороже, но позволяет сохранить материал пригодным для дальнейшего использования.
Хранение яйцеклеток
Сколько стоит заморозка яйцеклеток в Санкт-Петербурге, зависит также от длительности хранения в условиях криоконсервации. Стоимость хранения яйцеклетки после криоконсервации в СПб в центре репродукции «Генезис» составляет 1300 руб. в месяц. Хранение яйцеклеток и эмбрионов осуществляется длительное время до момента их использования или письменного отказа от хранения.
Витрификация эмбрионов
Экстракорпоральное оплодотворение — это методика вспомогательных репродуктивных технологий, которая помогает побороть бесплодие у пациентов, которые уже отчаялись испытать радость материнства и отцовства. Суть процедуры заключается в оплодотворении экстракорпорально (вне организма женщины, то есть, в условиях лаборатории) и переносе полученных эмбрионов в полость матки женщины. Но не всегда ЭКО может закончиться в одном цикле. Или же эмбриологи получили большее количество жизнеспособных эмбрионов, нежели возможно перенести в матку женщины в данном протоколе. Именно тогда применяется такой метод, как витрификация эмбрионов.
Заведующая лабораторией, к.б.н.
Стаж работы 18 лет.
Что такое витрификация
Что такое витрификация эмбрионов? Это метод криоконсервации (заморозки) эмбрионов с возможностью сохранения их жизнеспособности и качества для дальнейшего использования в протоколах экстракорпорального оплодотворения.
Криоконсервация, витрификация — это особый метод, который подразумевает под собой мгновенное замораживание эмбрионов. Отличительной особенностью от обычной заморозки биологического материала является то, что при витрификации жидкая среда не превращается в кристаллы, не кристаллизуется.
Важными моментами в проведении процедуры витрификации является качество используемых криопротекторов (от этих материалов зависит безопасность материала как в период заморозки, так и на этапе разморозки эмбрионов), а самое главное — квалификация специалистов.
Схема витрификации эмбрионов
Преимущества метода
Метод витрификации полностью исключает такие риски.
Схема витрификации яйцеклеток
Сравнение витрификации и простой заморозки
Показания
Данная статья не может быть использована для постановки диагноза, назначения лечения и не заменяет прием врача.
Что такое витрификация яйцеклеток (ооцитов) и эмбрионов, и чем она отличается от традиционного замораживания?
Термином «витрификация» называют метод сверхбыстрого замораживания живых объектов. Это новая методика, которая, в отличие от традиционной криоконсервации, позволяет замораживать женские половые клетки и эмбрионы на длительный срок практически без потери их жизнеспособности. Принципиальное отличие витрификации от криоконсервации заключается в том, что к ооцитам (яйцеклеткам) невозможно применить тот же процесс заморозки-оттаивания, как к эмбрионам, потому что при формировании кристаллов льда в процессе охлаждения при традиционном способе серьезно повреждается мембрана и цитоплазматическая структура яйцеклетки. Витрификация позволяет свести к минимуму формирование кристаллов льда и из-бежать повреждения клетки, так как переход вещества в аморфное состояние в результате очень быстрого охлаждения или нагревания происходит без образования кристаллов. Первые дети, развившиеся из оплодотворенных витрифицированных ооцитов, родились в Японии в 2002 году, потом этот метод был принят на вооружение в США и Израиле. Сегодня в мире растет несколько сотен таких малышей, и они ничем не отличаются от детей, зачатых обычным путем. Особую ценность методу витрификации придает возможность его использования для сохранения яйцеклеток тем пациенткам, которые вынуждены отложить материнство в связи с тем или иным заболеванием, возрастными изменениями и т. п. Витрификация широко используется для сохранения репродуктивного материала пациенток молодого возраста, которые планируют сложное, в том числе онкологическое, лечение, которое может сказаться на репродуктивной функции.
Витрификация яйцеклеток
Сверхбыстрое замораживание или витрификация представляет собой достаточно новую методику, которая дает возможность в интересах молодой пациентки сохранить яйцеклетки для применения в неопределенном будущем.
Основным преимуществом методики витрификации в сравнении с криоконсервацией, является возможность замораживать яйцеклетки на весьма длительный срок без утраты их жизнеспособности.
Данная методика позволяет свести к минимуму вероятность даже минимального повреждения ооцитов в ходе замораживания и не понижает результативности программ ВРТ. При этом срок хранения витрифицированных ооцитов является не ограниченным. Опыт показывает, что вероятность наступления беременности при применении витрифицированных клеток в программе экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) близка к результатам, которые были достигнуты с применением свежих клеток. Этот метод получает сегодня все большее распространение и положительные отзывы: с одной стороны она дает возможность сохранить репродуктивную способность пациентки при терапии, которая может оказать влияние на ее фертильность. Если же посмотреть с другой стороны, дает возможность отложить беременность и рождение ребенка на необходимый срок.
Зачем нужна витрификация?
У всех женщин первое постепенное уменьшение репродуктивной функции начинается уже ближе к тридцатилетнему возрасту, затем резко падает примерно в тридцать пять лет, а потом еще раз существенно снижается примерно в сорокалетнем возрасте. Старение яичников становится причиной того, что забеременеть становится всё сложнее, а если все-таки наступает беременность, тогда шанс родить абсолютно здорового ребенка является довольно небольшим.
Женщина всегда рождается с определенным количеством овариальных фолликулов, которое уменьшается постепенно в ходе овуляций в репродуктивном возрасте (в каждом месячном цикле погибает около 1000 ооцитов, поэтому в тридцатипятилетнем возрасте остается лишь 10 процентов от общего числа резерва). Однако проблема лежит не только в том, что уменьшается число яйцеклеток, но также и в том, что с возрастом существенно ухудшается их качество. Возраст приносит свои изменения, так что у женщины в период с 38 до 40 лет наступает преждевременное истощение яичников, а это становится причиной репродуктивной недостаточности. Кроме того, в этом возрасте повышен риск формирования мутаций плода (21 хромосома является самой маленькой в геноме человека, однако одна ее лишняя копия провоцирует появление тяжких последствий – низкого уровня умственного развития, синдрома Дауна).
На сегодняшний день женщина, оставившая на сохранение свои здоровые яйцеклетки в юном детородном возрасте, может спокойно продолжать выстраивать карьеру.
При этом возраст пациентки на момент процедуры пересадки оплодотворенной яйцеклетки особого значения не имеет, намного важнее тот возраст, в котором ооциты были получены и верифицированы.
Когда показано применение витрификации ооцитов?
Банк донорских яйцеклеток
Чтобы оптимизировать и совершенствовать работу программ с донорскими ооцитами, в большинстве современных клиниках и центрах репродуктивных технологий создаются банки донорских витрифицированных яйцеклеток. Все доноры ооциты проходят процедуру строгого отбора и максимально тщательного медицинского обследования, в соответствии всем нормам, которые установлены законом.
В банк могут входить ооциты анонимных доноров, отвечающие следующим критериям:
Каковы показания к применению донорских яйцеклеток
Как происходит витрификация ооцитов?
Процесс очень схож со стимуляцией яичников при обычном цикле экстракорпорального оплодотворения. С помощью медикаментозных препаратов происходит стимуляция, а потом при помощи пункции осуществляется забор яйцеклеток.
В день пункции ооциты замораживаются при помощи процедуры витрификации, сверхбыстрого метода замораживания. Основное отличие витрификации от процедуры медленного замораживания заключается в том, что отсутствует фаза кристаллообразования. Чтобы достичь этой цели используется большое число крио протекторов, чтоб максимально предотвратить поломку мембран половой клетки.
Спустя некоторое время, когда женщина примет решение забеременеть, замороженные ооциты размораживаются с дальнейшей инсеминацией. Эмбрион культивируется в течение двух-трех дней и переносится в полость матки без проведения гормональной стимуляции пациентки.
Преимущества применения технологии витрификации яйцеклеток
Витрификация ооцитов заключается в замораживании ооцитов в минимальные, в сравнении с традиционной технологией криоконсервации, сроки. Благодаря этому, крошечные кристаллы льда, которые способны повредить оболочку яйцеклеток, образоваться не успевают. В итоге, после размораживания эмбриолог может получить до 99 процентов жизнеспособных яйцеклеток, которые способны к оплодотворению. А вот при применении крио консервации выживает не больше 60 процентов ооцитов.
Исследования продемонстрировали, что яйцеклетки после размораживания оплодотворяются также, как и «свежие» ооциты. Яйцеклетки после крио консервации не показывают таких высоких результатов, так как их оболочки уплотняются, что несколько затрудняет процесс проникновения сперматозоидов.
Преимущества витрификации эмбрионов
Пациентки часто спрашивают меня, не опасна ли заморозка/разморозка эмбрионов? На сколько эффективен протокол, если перенос делать с использованием размороженных эмбрионов?
Доктор Масашиге Куваяма изобрел метод витрификации на криотопах в 2000 году. С тех пор его метод использовался более 500000 раз по всему миру в более чем 1200 клиниках сорока стран с неизменно превосходными результатами. Доктор Куваяма основал первый в мире банк человеческих ооцитов и получил первого ребенка на витрифицированных эмбрионах в Японии в 2002 и в США в 2003 г.
В настоящее время метод был значительно усовершенствован, улучшены растворы и создан новый дизайн витрификационных планшетов и планшетов для размораживания. В результате метод КриоТех (CryoTechVitrification) приобрел высочайшую эффективность и простой протокол использования.
Внедрение метода витрификации в эмбриологическую практику позволило повысить выживаемость ооцитов и эмбрионов человека при криоконсервации до 98%.
У 50% пациенток после ЭКО могут оставаться эмбрионы для криоконсервации. Цикл замораживания и переноса размороженных эмбрионов значительно дешевле, чем проведение нового цикла ЭКО, и наличие замороженных эмбрионов является для пациентов своего рода «страховкой» на тот случай, если беременность не наступит.
Витрификация эмбрионов позволяет существенно повысить шансы наступления беременности после ЭКО и предотвратить гибель нормальных жизнеспособных эмбрионов, оставшихся после протокола. Это самое важное преимущество криоконсервации.
По данным разных клиник выживаемость эмбрионов после витрификации находится в интервале 80-90%, в то время как при «медленном» замораживании существенно ниже.
В ряде исследований была выявлена более высокая частота наступления беременности и родов после переноса витрифицированных эмбрионов по сравнению с переносом свежих эмбрионов в стимулированном цикле – это связано с «гормональным взрывом» во время стимуляции овуляции (когда растет не один фолликул, а несколько), что может негативно отражаться на эндометрии и приводить к раннему закрытию «окна имплантации». В связи с этим появилось мнение, что тактика отложенного («сегментированого», т.е. разделенного со стимуляцией) переноса может быть эффективна не только для снижения риска СГЯ, но и для повышения шансов на наступление беременности.
Более того, беременность, наступившая в стимулированном цикле чаще осложняется такими проблемами, как гестационный сахарный диабет, гипотиреоз, гестоз и другие.
Замораживание всех эмбрионов для будущего переноса в полость матки может быть рекомендовано женщинам, имеющим повышенный риск развития синдрома гиперстимуляции яичников после проведения индукции суперовуляции в цикле ЭКО, а также пациенткам перед проведением химио- или радиотерапии по поводу онкологических заболеваний.
Витрификация эмбрионов показана во всех случаях, когда вероятность имплантации эмбриона в полости матки снижена, например, при наличии полипа эндометрия, недостаточной толщине эндометрия к моменту переноса эмбриона, дисфункциональном кровотечении. Замораживание эмбрионов может быть включено в цикл донации яйцеклеток, если по каким-то причинам сложно провести синхронизацию менструальных циклов донора и реципиента.
Таким образом, процедура ЭКО становится все безопаснее, доступнее и эффективнее. А детки ЭКО радуют и дают смысл к жизни своим родителям.
Несколько клинических случаев из практики:
Пациентка А., 27 лет, абсолютный трубный фактор (удаление обеих труб по поводу внематочных беременностей), гормональные показатели в пределах нормы, параметры спермограммы хорошие, МАР-тест – отрицательный, два неудачных протокола ЭКО в других клиниках, оба свежие переноса, т.е. через 5 дней после пункции. Гистероскопия (оценка состояния полости матки и эндометрия) проведена перед 2-ым протоколом – без патологии. Нами получено 18 яйцеклеток, заморожено на 5 сутки 10 хороших эмбрионов, отмена переноса. У пациентки пришла менструация, на 10-12 день цикла узи – практически полный регресс желтых тел, явка на 4-5 день цикла, перенос размороженного эмбриончика на 17 день цикла при подготовке эндометрия препаратами заместительной гормональной терапии, ХГЧ на 12 ДПП 178 мЕД\мл J
Пациентка М., 36 лет, субмукозная миома матки (миома, которая растет в полость матки, деформирует полости матки и мешает имплантации) и мужской фактор бесплодия, подготовлена к протоколу ЭКО + ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида), получено 6 яйцеклеток, заморожено 3 эмбриона на 5 сутки, следующим этапом проведена гистерорезектоскопия и удаление узла миомы, подготовка эндометрия 2 месяца, перенос размороженного эмбриона на 18 дмц, ХГЧ 11 ДПП 125 J
Пациентка, С, 32 лет, бесплодие обусловленное эндометриозом (оперирована дважды L по поводу эндометриоидных кист), снижение овариального резерва, АМГ 0,7, проведен протокол ЭКО, получено 8 яйцеклеток, 3 эмбриона на 5 сутки, пациентка очень настаивала на переносе в свежем цикле, на 5 сутки перенесли 1 эмбрион (2 криконсервированы), прогрессирующая беременность осложнилась сахарным диабетом беременных с 18 недели, с 26 недель стало повышаться давление и появились отеки рук и ног, госпитализирована, в 35 недель преждевременное излитие околоплодных вод, кесарево сечение, родился недоношенный мальчик 2900 г (при диабете детки часто крупнее обычного), переведен в отделение детской реанимации, затем на выхаживание, выписан домой через 20 дней в удовлетворительном состоянии J) Все хорошо, что хорошо заканчивается!
Всем счастливой беременности и родов!
Автор статьи: врач-репродуктолог Клиники «Мать и дитя» Юго-запад Кузнецова Е.М.